灭菌教学设计
第1篇：灭菌制剂练习题
1.热压灭菌所需的温度和时间是多少？
2.影响湿热灭菌的因素及使用热压灭菌器应注意的事项有哪些？如何防止灭菌过程中出现工伤事故及药品有菌的问题？
3.影响F0值的因素有哪些？说明D值与Z值的定义。
4.无菌操作与避菌操作有何区别？在药物制剂生产中什么情况下需要采用无菌操作？
5.某产品灭菌，每分钟测量一次温度，0分钟为25℃，依次为50℃、100℃、110℃、118℃、120℃、121℃、100℃，共测7分钟，F0 为多少？此F0是否达到灭菌要求？
（2.39min）
6.说明热原的组成和性质、产生热原的途径及消除热原的方法。说明注射剂的质量要求及其检查方法。
7.蒸馏水和注射用水有何区别，在注射剂处方中应该用什么水，滴眼剂中用什么水？
8.注射剂生产按生产工艺及质量要求分哪些区？各级洁净度适用范围有哪些？
9.注射剂中常用的附加剂有哪些？起什么作用，常用浓度为多少？
10.说明滤过的机理，影响过滤的因素、常用过滤器的种类特点及选用原则。
11.说明中草药注射剂存在的问题及解决方法。
12.输液在生产中及在使用中常出现的问题有哪些？采取哪些措施解决？
13.营养输液包括哪些类型？各类型营养输液的基本组成是什么？
14.说明冷冻干燥的原理及在冷冻干燥中与无菌分装工艺中出现的问题及解决方法。
15.今欲制备5mg/ml安定注射液1000支（每支2ml），试设计处方及工艺操作要点，并说明设计依据。
16.已知1%（g/ml）枸橼酸钠水溶液的冰点降低值为0.185℃，计算其等渗溶液浓度。
（2.81%）
17.5%的葡萄糖（按含H2O 计）生理盐水（含NaCl0.9%），其mosm/L是多少。
（560.1mosm/L）
18.滴眼剂的种类及应用特点。
19.试述滴眼剂的质量要求，它与注射剂比较有何异同点？
20.说明眼用药物的吸收途径及影响吸收的因素。
21.试述滴眼剂的处方设计与生产工艺。
22.说明滴眼剂常用的附加剂种类、作用及其选用。
23.说明滴眼剂常用的包装及其与制剂质量的关系。
第2篇：高压蒸汽灭菌
压力蒸汽灭菌相关知
★灭菌、无菌物品定义
灭菌 是指杀灭或清除传播媒介上的所有微生物（包括芽胞），使之达到无菌程度。经过灭菌的物品称“无菌物品”。用于需进入人体内部，包括进入血液、组织、体腔的医用器材，如手术器械、注射用具、一切置入体腔的引流管等，要求绝对无菌。★灭菌方法
主要分高温和低温两种，高温包括压力蒸汽灭菌、快速压力灭菌和干热灭菌。低温灭菌包括环氧乙烷灭菌、低温等离子灭菌，低温甲醛灭菌等。热力灭菌
热力灭菌法是利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性，酶活性消失，致使细胞死亡。通常有干热、湿热（压力蒸汽灭菌）。压力蒸汽灭菌器
压力蒸汽灭菌器是利用高温高压的饱和蒸汽对微生物进行灭活，是湿热灭菌方法，是应用最早、最环保、效果最可靠的灭菌方法。压力蒸汽灭菌适用范围
适用于耐高温、耐湿的器材和物品的灭菌。如培养基、金属器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡胶及一些药物的灭菌，禁用于不允许湿热气体穿透的油脂（如油性软膏机制、注射用油等）干粉类化学药品和密闭容器的灭菌。干热灭菌
干热灭菌是指热空气灭菌。一般在电烘箱中进行。干热灭菌所需温度较湿热灭菌高，时间也较湿热灭菌长。这是因为蛋白质在干燥无水的情况下不容易凝固。一般须在160℃左右保持恒温3～4小时，方能达到灭菌的目的 干热灭菌适用范围
用于耐高温的玻璃和金属制品以及不允许湿热气体穿透的油脂（如油性软膏机制、注射用油等）和耐高温的粉末化学药品的灭菌，不适合橡胶、塑料及大部分药品的灭菌。★压力蒸汽灭菌
包括下排气式和预真空、脉动真空压力蒸汽灭菌。
预真空对真空度要求低些，通常在工作前抽一次真空，灭菌结束后再抽真空强制排气干燥。脉动真空对真空度要求较高，一般要求达到-0.08Mpa以下,冷空气排净率应达99.8%以上，抽真空次数至少3次以上。这些由设备程序控制实现。
压力蒸汽灭菌器灭菌参数
设备类别
物品类别
温度
所需最短时间
压力 下排气式
敷料
121℃
30min
102.9kPa
器械
121℃
20min
102.9kPa 预真空式
器械、敷料 132～134℃
4 min
205.8kPa 硬质容器和超重的组合式手术器械，应由供应商提供灭菌参数。
压力蒸汽灭菌的关键参数：时间、温度、饱和蒸汽
常规灭菌压力灭菌程序
一般4个阶段： 条件设定、暴露（维持规定的灭菌时间）
排气、干燥（大多数情况下）
灭菌器操作步骤
①灭菌前准备 ②灭菌物品装载 ③灭菌操作 ④无菌物品卸载 ⑤灭菌效果监测
1、灭菌前准备
⑴每天设备运行前进行安全检查
⑵应进行灭菌器预热 ⑶每日灭菌前进行BD试验，结果合格后该灭菌器方能使用。△设备运行前进行安全检查
包括灭菌器压力表处在"零"的位置；记录打印装置处于备用状态；灭菌器柜门密封圈平整无损坏，柜门安全锁扣灵活、安全有效；灭菌柜内冷凝水排出口通畅，柜内壁清洁；电源、水源、蒸汽、压缩空气等运行条件符合设备要求。
2、B-D测试
定义：B-D测试是检测预真空或脉动真空压力蒸汽灭菌器空气排出效果和蒸汽穿透效果的测试。必须每天进行BD测试； 在下列情况也应进行BD测试；
1、灭菌器大修后；
2、移机后或者安装测试时；
3、灭菌失败后； B D测试的正确操作
B D测试应该在预热后，空锅，放置在排气口的上方靠近门处，132 ℃～134 ℃，3.5分钟的情况下进行。
位置：应该放置在排气口的上方，靠近门处。 BD测试包应放在柜架上，不靠柜壁。
温度：为132 ℃～134 ℃。现在一般选用134 ℃
时间：推荐为3.5分钟。如机器硬件不支持0.5分钟的设定则使用4分钟。但绝不能超过4分钟。
测试结果判读注意：颜色不一定要很黑，只要均匀一致，中间没有“小太阳”产生就算BD测试通过。
不均匀变色-小太阳时应
-重复测试、关闭机器、维修、重新测试(连续的3次循环)灭菌前装载
确保蒸汽在进行灭菌的所有物品表面自由流通 防止湿包发生
有效去除空气和冷凝水，以达到灭菌效果
灭菌包之间应留间隙，一般距离≥2.5cm（物品之间至少有空间插入伸直的手）
物品不接触灭菌器内壁及门，以防冷凝水。
将相同材质的器械、器具、物品置于同一批次灭菌，若有混装，织物类立起置上层，金属类置下层。
无漏孔的碗盘盆类斜放，容器开口朝向一致，使蒸汽由上往下渗透时减少阻力。
纸袋、纸塑袋包装应侧放，利于蒸汽进入和空气排出 纸塑袋并列放置时，应使纸面向下，与塑面相对放置。 装载量，最大不超过容积的90%，最少不少于容积的5%和10% 灭菌器操作
灭菌器操作人员必须经过培训，掌握机器的性能、操作规程及应急处理，取得相应资格证书，持证上岗。
观察运行参数是否达到标准，设备是否正常
运行中注意是否存在漏气，压力温度的情况，同时核对记录 按照规范进行生物监测，测试包放于腔内下部、排水管上方 记录：名称，数量，锅号锅次，灭菌程序，温度，日期，时间，操作者 灭菌结束后将运行单、操作记录单、检测结果留档3年 无菌物品卸载
取出灭菌架，放置冷却30min后再卸载（以防湿包） 车不得放于排气口或风扇旁边
取出无菌物品时，应进行灭菌质量的确认，包括： 检查检测结果，化学指示卡颜色变化，生物监测或批量检测 检查包装完好性、检查有无湿包
湿包、无菌包掉落地上或误放到不洁处视为被污染 ★灭菌质量监测 灭菌监测基本包括
物理监测、化学监测、生物监测 物理监测
主要是内置型的时间、压力、温度量表，或者由设备最终打印出来的过程数据单据；
可对周期参数的精确测量；●提供测试点的大致的实时信息；
需要进行定期的校准和重校； 物理监测的特点
只能监测腔体和夹层中一点温度和压力，无法监测包裹内部情况
无法直接和精确考核: －蒸汽质量
－不可压缩气体 －冷空气等 不能直接反映微生物死
化学监测：利用各种化学指示物与灭菌介质的相互作用，在特定的灭菌条件下产生化学反应，进而产生颜色变化或形体改变，来达到对灭菌过程进行监测，以指示灭菌因子的强度和作用时时间是否符合消毒或灭菌处理的要求 包括：包外化学监测、包内化学监测、B-D测试
包外化学监测：条纹内含特殊热敏涂料，米白色变成深褐色
指示是否经历灭菌过程；反映包外灭菌质量； 提供信息记录的载体； 封包－协助包裹无菌屏障的构建； 考核灭菌器的装载是否合理；
品名，科室，检查/包装者，锅号/次，灭菌日期，失效日期 包内化学指示物
指示灭菌剂是否穿透到包内； 到达终点，可认为该包灭菌合格； 不能使用包外化学指示物代替； 影响包内化学指示剂变色的因素
灭菌失败； 冷凝水影响（器械，器皿等物品）；蒸汽质量不好，冷空气残留；
敷料制作时相对湿度控制不好；灭菌的过度暴露（银灰色）； 第5类：整合型化学指示剂
监测所有关键参数； 对温度和时间的误差比普通卡小；
爬行式判读方式，完全避免人为因素；终点到达过程模拟生物指示剂的性能； 防水设计，完全避免冷凝水的影响
生物监测：通过标准化的菌株和合乎要求的抗力来考核整个负荷是否达到灭菌合格的要求，将最难杀灭的微生物放在灭菌器内最难杀死部位和标准测试包内。生物监测综合了所有参数，是反映灭菌效果最重要的监测方法
唯一使用微生物对灭菌进行挑战的方法；能监测所有参数，不仅仅关键参数； 可以监测蒸汽质量，和微小空气团；能综合反应整个负荷； 能反映微小的灭菌失败，大大降低风险； 能推导和计算出10-6的无菌水平； 嗜热脂肪杆菌芽胞：压力蒸汽灭菌 枯草杆菌黑色变种芽胞：EO和干热
培养时间: 蒸汽:菌片7天, 自含式2天, 快速型:1-3小时
环氧乙烷:菌片7天, 自含式2天, 快速型:4小时
干热:菌片7天
培养温度: 蒸汽: 56℃，环氧乙烷和干热: 37℃
每次培养，都选择一支未经过灭菌的同一批次生物指示物进行培养，如果同一天用同一批次的几个生物指示物进行了几次测试，那么只要使用该批次的一个生物指示物做阳性对照 每次生物监测应进行阳性对照其意义在于：
确保正确的培养条件；确保芽孢在使用前正常的发育能力； 压力蒸汽：
对照管：紫
黄；必须阳性
测试管：紫
黄；灭菌失败
测试管：紫
紫；灭菌通 生物指示剂监测频率
生物监测应每周进行一次
灭菌植入性器械每批次进行生物监测
植入物及植入型手术器械应在生物合格后方可发放。
新安装、移机、大型维修、灭菌失败后，应连续三次进行生物监测； 采用新的包装材料和方法灭菌时，应进行生物监测
生物监测不合格，分析不合格的原因，改进后，生物监测连续三次合格后方可使用。放在哪里？
放在灭菌器“最难灭菌的区域”，该区域代表着对生物指示物的挑战最大 排气口上方靠近舱门的位置 正确摆放
离灭菌室底面高度为10CM—20CM，测试包的正面朝上，避免倒置。不要将测试包竖放或斜靠在其他物品上.不要将测试包放在其它灭菌包或硬质容器上。生物监测结果的处理标准
情况一：生物监测结果未出来，紧急放行时
紧急情况灭菌植入型器械时，可在生物PCD中加用5类化学指示物，5类化学指示物合格可作为提前放行的标志，生物监测的结果应及时通报使用部门 情况二：生物监测结果不合格 生物监测不合格的物品不得发放。
应尽快召回上次生物监测合格以来所有尚未使用的灭菌物
品，重新处理;并应分析不合格的原因，改进后生物监测连续3次后，方可发放。生物监测结果的处理标准
如果在召回前灭菌物品已经使用，则感染控制专家应与集中处理中心、外科、风险管理人员一起评估发生感染的风险。
建立《不良事件报告制度》，规范上报程序。★什么是PCD 在国内外标准中，用来模拟被灭菌的物品，并对灭菌的过程进行标准的挑战，从而保证灭菌质量的测试装置； ★导致压力蒸汽灭菌失败的潜在风险
空气排除不彻底
蒸汽质量差
循环温度不够
时间不够
包装和装载
不适当清洗 ★控制湿包
使用蒸汽灭菌过程就可能出现湿包。在完成一个灭菌周期后，当发现水分以潮气，水滴或水坑形式存在在包里时，该包就被认为是湿包。湿包被认为是已污染的，必须完全重新包装和重新处理。当这样做时，所有的织物和托盘上或包里的过程指示卡必须更换。★湿包的原因
• 包内出现的水分往往是金属物品以让水蒸汽堆积或陷入，后来变成水的方式放置的结果。
• 仪器与盆组过于密集或超载，缺乏吸水材料吸收水分，会形成湿包。• 亚麻包如果包裹的过于紧实也会保持水分。• 器械组和其他包可能正确装配，但不正确加载。
• 设备的特殊设计或制造材料可能需要延长干燥时间（按照制造商的建议）。
第3篇：紫外灭菌验证
验证过程中的性能确认
http://www.xiexiebang.com/ 点击数：21 发布时间：2011年11月6日 来源：
自净式传递窗验证过程中的性能确认
自净式传递窗已经过安装检查确认和尘埃粒子测试，各性能参数符合生产要求后。在自净式传递窗紫外线消毒后，通过已经过微生物学、无菌知识等相关知识的培训的人员进行挑战性实验对紫外线消毒效果及消毒时间进行验证，确认紫外线消毒效果及消毒所需时间。一自净式传递窗验证程序：
紫外线消毒前，将塑料管内的生物指示剂菌片无菌移入（用灭菌后的镊子）到灭菌后的培养皿中（一个培养皿放三个菌片），用灭菌后的大头针支起，尽量让菌片两面接触空气，裸露在空气中，紫外线消毒时放在自净式传递窗内合适的位置（关键部位、离高效和回风口最远的地方），开启紫外灯及自净风机开始进行消毒，分别做在消毒开始后10分钟、15分钟、20分钟三次实验，每次结束后用无菌操作的方法（用灭菌后的镊子）将培养皿中的菌片（每次一片）移入到装有枯草芽胞杆菌培养液的塑料管内拧紧，做好状态标记，放入密封容器保存。
培养及结果观察：分别将消毒不同时间段取出的生物指示剂置于恒温箱中37℃进行培养，同时取一支未经灭菌的枯草芽胞菌片加入枯草芽胞杆菌培养液内的塑料管中作阳性对照，经48小时培养后,阳性对照的培养液应呈浑浊生长,培养液由红变黄。经灭菌后培养的菌片液体应澄清，培养液仍为原来的红色。经初步观察后再继续培养7天，结果仍与第一次观察的结果一样，则判为验证合格。根据培养的结果判断紫外线消毒的效果。
注：生物指示剂名称：枯草芽胞杆菌（Bacillus Subtilis Atcc6633）生物指示剂性状：圆片形、红色液体 生物指示剂含菌量：5×105～6CFU/片 适用范围：气体灭菌 有效期：一年 生产厂家：上海
二 偏差处理：对确认过程中出现不符合要求的项目进行偏差处理。1 处理方法：
2 该系统在确认过程中，应严格按照制定的系统操作程序、维护保养程序、采样操作程序、检测程序和质量标准进行操作和判定。
3 当由于出现故障或系统出现其它原因时应该作为偏差情况进行处理立即启动偏差处理，组织相关人员分析出该项目不符合标准要求的原因后，发整改通知，要求该项目负责部门或单位立即整改，整改合格后，重新进行确认，确保该项目符合标准要求，并编写偏差处理报告，内容包括：该项目负责部门或单位、发生的原因、不符合项目特征、整改过程、重新进行确认记录等相关内容。
4 重新采样：由于采样、外部环境等因素有时会出现个别采样点不合格现象，这时应考虑重新采样，符合以下要求：
（1）在不合格的采样点重新取一次。
（2）如仍不合格，分析不合格原因，并对存在问题进行整改。
（3）问题解决后重新采样，如检查合格，再重复取样一次检查，结果必须符合要求。5 可接受标准：不符合标准项目必须找到原因，进行整改，并重新进行确认直至合格。6.验证总结及评价见附件
（一）7.再验证周期：一年
常用消毒灭菌效果评价实验操作实例
1、目的要求：熟悉压力蒸汽灭菌、紫外线消毒效果试验的检测方法。
2、器材和试剂
（1）菌种：枯草芽孢杆菌黑色变种。
（2）指示剂：嗜热脂肪芽孢杆菌菌片、枯草芽孢杆菌黑色变种菌片。
（3）培养基：普通营养琼脂培养基、普通肉汤培养基、溴甲酚紫蛋白胨水。（4）试剂：消毒剂及其相应的中和剂、洗脱液。
（5）其他器具：压力蒸汽灭菌器、紫外灯、无菌镊子、无菌吸管。
3、步骤和方法
（1）压力蒸汽灭菌效果的检测方法：①将5片嗜热脂肪芽孢杆菌菌片分别装在灭菌的试管中，管口用牛皮纸包封，然后置在通气储物盒内；②将通气储物盒放于手提压力蒸汽灭菌器 内5个不同的位置；③103.43kPa灭菌20—30min后，以无菌手续取出菌片，放入溴甲酚紫蛋白胨水培养基中，于56%培养48h，观察培养基颜色的变化；④如所有培养基均不变色，外观澄清，说明无菌生长，则灭菌合格；如有1支培养基颜色变黄且外观浑浊，说明有细菌生长，则灭菌不合格。（2）紫外线杀菌效果的检测方法：①取市售大肠埃希菌ATCC25922染菌的载片8个置于距紫外灯管垂直1m处，开启紫外灯照射，于30、60、90、120min4个不同间隔时间各取出2个放入盛有洗脱液的试管中，振摇80次后进行适当稀释；②取0.5ml洗脱液做倾注平板，35℃培养48h，做菌落记数；③试验同时做阳性对照，除不做照射外，其他操作同上；④计算杀灭率
杀灭率=（阳性对照组菌落数-试验组菌落数）*100%/ 阳性对照组菌落数 ⑤对指示菌杀灭率≥99.9%，判为消毒合格。达到物理检测标准时，作为消毒合格的参考标准。
药典附录上有呀，湿热灭菌用嗜热脂肪芽孢杆菌，干热灭菌用枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢，臭氧消毒用枯草芽孢杆菌
开臭氧消毒前监测结果与消毒后结果进行比较；每天臭氧空气消毒后取样监测浮游菌、沉降菌、设备表面微生物数连续监测7天，结果应符合下述规定。
洁净级别 浮游菌数 /CFU•m3 沉降菌 CFU/皿 设备表面细菌数 CFU/6.25㎡ 100级 5 1 3 10000级 100 3 5 100，000级 500 10 ― 生物指示剂与药典规定的一致。
表面菌检查 前后
第4篇：外植体灭菌
外植体灭菌
对材料的表面浸润灭菌。要在超净台或接种箱内完成，准备好消毒的烧杯、玻璃棒、酒精、消毒液、无菌水、手表等。用酒精浸10-30s。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用，加之酒精穿透力强，也很易杀伤植物细胞，所以浸润时间不能过长。有一些特殊的材料，如果实、花蕾、包有苞片、苞叶等的孕穗，多层鳞片的休眠芽等等，以及主要取用内部的材料，则可只用酒精处理稍长的时间。
升汞是由重金属离子汞来达到灭菌的，一般处理5-8min，用无菌水冲3-10次。
吐温是表面活性剂，主要作用使药剂更容易展布，更容易浸入到灭菌的材料表面。但吐温加入后对材料的伤害也在增加，应注意吐温的用量和灭菌时间。处理完的材料在无菌条件下，取用内部材料。
第5篇：消毒灭菌隔离制度
消毒灭菌隔离制度
（一）严格执行《医院感染管理办法》、《医院消毒技术规范》及《传染病管理法》等法规，并达到以下要求：
1． 凡进入人体组织、无菌器官的器具和物品必须达到灭菌水平。2． 凡接触皮肤、黏膜的医疗器械的器具和物品必须达到消毒水平。
3． 各种用于注射、穿刺、采血等有创操作的医疗器具必须“一人一用一灭菌”。
4． 一次性使用的医疗器械和器具应符合国家有关规定。一次性使用的医疗器械和器具不得重复使用，用后的一次性物品按《医疗废物管理条例》处理。
（二）加强医院感染重点部门的管理，包括口腔科、手术室、供应室、重症监护室、新生儿病房、内镜室、血液透析室、层流室、肠道门诊、发热门诊等，并达到以下要求：
1． 按照《医院感染管理办法》要求，对重点部门的医院感染管理有相应的措施。
2． 各部门对消毒灭菌效果检测有原始记录。
3． 护理人员能正确掌握控制医院感染的基本措施、标准预防、消毒隔离方法。
（三）护理人员严格执行无菌操作规程、消毒隔离制度、手卫生规范，并达到以下要求：
1．制定有无菌技术操作规程，护理人员严格按照规程进行。
2．消毒隔离制度与相关措施到位，人流、物流有明确的流程标识。3．有手卫生规范并对护理人员进行培训。凡接触病人及操作前后均要进行卫生学洗手，接触传染病人按传染病房刷手法。
（四）按照规定可重复使用的医疗器材消毒或灭菌，达到以下要求： 1．建立有可重复使用的医疗器材消毒或灭菌制度、操作常规与合格的标识目录和可使用范围（器械、穿刺包、换药碗、碘酒、酒精瓶、氧气湿化瓶、雾化器、呼吸机管道等），由供应室统一处理。2．有医院感染管理部门对可重复使用的医疗器械消毒或灭菌效果的定期与不定期监测的原始资料与记录。
3．医疗器械的消毒灭菌合格率达100%。包内有化学指示卡，包外贴3M指示带。无菌物品专室，专柜存放，每日检查品名、有效期。无菌包一经打开不超过24小时；铺无菌盘不超过4小时；无菌干罐持物钳不超过4小时。
4．对监测不合格的医疗器械有处理程序和记录。
（五）协助医院感染管理科进行各项监测，对监测中发现的问题及时分析、整改、并有记录。
（六）护理人员要加强自身防护，在班时必须穿工作衣、裤，着装整齐；无菌操作时戴口罩、帽子；遵循“标准预防”原则，当接触血液、体液或损伤之皮肤、黏膜或组织时，均应戴手套。
（七）病人安置的原则：感染与非感染病人应分室安置，同类感染病人相对集中，特殊感染病人单独安置。传染病和可疑传染病要的各类污染物品和排泄物，严格按先消毒后排放的原则进行处理。
（八）病人床单位、布类、用品、餐具、便器，做到“一人一用一消毒”，病人出院、转科或死亡后进行终末处理。
（九）治疗室、配餐室、病室、厕所等区域每日湿式清扫，拖布专用，标识明确，分类清洗，悬挂晾干，定期消毒。
（十）医疗废弃物分类收集处理，感染性医疗废弃物置黄色塑料袋内，损伤性废弃物置硬性容器内，标识清楚、交接登记，密闭运送、无害化处理。特殊感染性废弃物放入指定容器中密封，焚烧处理。生活垃圾置黑色塑料袋内。
