蛙腓肠肌实验
坐骨神经腓肠肌标本制备 121140066 许克波 一、实验目的 学习坐骨神经腓肠肌标本的制备方法。
二、实验原理 两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似，而其离体组织所需要的生活条件比较简单，易于控制和掌握。因此在生理实验中常用蟾蜍的神经肌肉标本来观察兴奋性、兴奋过程、刺激的规律以及骨骼肌收缩的特点等。
三、实验对象及器材 蟾蜍、蛙类手术器械、烧杯、培养皿、棉球、纱布、细丝线、粗剪刀、蛙板等。
四、实验步骤 1.破坏脑和脊髓 左手持蛙，用食指压其头部前端，使头前俯。右手持探针由头端沿正中线向后划，触到凹陷即为枕骨大孔，将探针由此垂直刺入。再将探针折向前方，插入颅腔内并左右搅动捣毁脑组织。再将探针退回至进针处，针尖转向后方，刺入椎管捣毁脊髓。此时蟾蜍四肢瘫软，表明脑脊髓已完全破坏。
2.剪除躯干上部及内脏 用粗剪刀在骶髂关节水平以上 1cm 处剪断脊柱。左手握住后肢，右手持剪刀沿脊柱的断口向下剪开两侧的皮肤及肌肉，再剪除已下垂的躯干上部及内脏。
3.剥皮 剪掉肛门周围的皮肤，左手捏脊柱断端（勿触碰神经），右手捏住断端边缘的皮肤，向下剥掉两后肢皮肤。将标本背位放于表面有少许任氏液的蛙板上，洗净双手及用过的器械。
4.游离坐骨神经 沿脊柱两侧用玻璃分针分离坐骨神经，用线在坐骨神经靠近脊柱处结扎并剪断。左手捏住脊柱，右手持剪刀从背面剪去向上突出的尾骨。然后从腹面沿中线将脊柱剪成两半。捏住两侧下肢带骨用力向两侧掰，使耻骨联合处脱臼，再从耻骨联合中央剪开两后肢，一后肢放入盛有任氏液的平皿中备用，一后肢用玻璃分针划开梨状肌及其附近的结缔组织，循坐骨神经沟（股二头肌与半膜肌之间的裂隙处）找出坐骨神经的大腿部分，用玻璃分针将腹部的坐骨神经小心勾出来，手执结扎神经的线，剪断坐骨神经的所有分支，一直游离至膝关节。
5.完成坐骨神经腓肠肌标本的制备 将分离干净的坐骨神经搭于腓肠肌上，在膝关节周围剪掉全部大腿肌肉，并用普通剪刀将股骨刮干净，在股骨中部剪去`上段股骨。再在跟腱处以线结扎，剪断并游离腓肠肌至膝关节处，在膝关节以下将小腿其余部分剪掉。这样即制得附着于股骨上、具有坐骨神经支配的腓肠肌标本。
6.检查标本兴奋性 用浸有任氏液的锌铜弓轻触坐骨神经，如腓肠肌发生收缩，表明标本兴奋性良好。如无锌铜弓，也可用中等强度单个电刺激作上述测试。
将标本放在盛有任氏液的培养皿中待用。
五、实验结果 我的标本由于操作错误，误将坐骨神经剪断，导致实验失败，图示为同组徐春晖同学的实验结果：
六、注意事项 1.避免用力牵拉神经或用手、金属器械直接接触神经。
2.游离腓肠肌时，必须保全其上的腓肠肌。
3.实验过程中要随时检查标本兴奋性，以便及时发现失误。
4.制备坐骨神经时，一定要把神经表面的结缔组织膜、血管、凝血块等清除干净。
