郭全胜开题报告
甘肃农业大学 学士学位论文开题报告 课 题 名 称 黄芪中黄芪多糖提取分离方法的比较 学 生 姓 名 郭 全 胜 导 师 姓 名 李 铁 汉 所 在 院 理 学 院 学 科 专 业 应用化学 年 级 2 0 1 0 级 攻 读 学 位 级 别 学 士 论文工作的起止时间 2013 年 9 月-2014 年 5 月 甘肃农业大学教务处制 2014 年 4 月 28 日 填写
填 填 表 需 知 一、填写本表前，学生应根据本表各部分要求写出初稿，交由各指导教师审阅。
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一、课题来源（结合实际解决生产单位实际工程问题的填写“A”；来自于生产实际已解决了的问题，重新让学生进行模拟的填写“B”；来自科研项目的全部或部分研究内容，是结合科研任务进行的填写“C”；其他题目的填写“D”）C 二、选题的国内外研究现状及水平、研究目标及意义（包括应用前景、科学意义、理论价值）以及主要参考文献 1.选题的国内外研究现状及水平：
黄芪是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根。黄芪性甘，微温，具有补气固表、利尿排毒、排脓等功效。对黄芪化学成分的研究，始于 20 世纪 50 年代初期。迄今为止，已从黄芪类中药中分离出了几十种活性成分，主要有效成分为多糖类、黄酮类、皂苷类及氨基酸类。其中黄芪多糖是由葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖和半乳糖等重复单元连接而成的杂多糖，相对分子质量在 1 万一 5 万 Da 左右，常温下为白色固体。黄芪多糖具有提高机体免疫功能、调节血糖、改善糖、脂代谢紊乱 [1] 等作用，且黄芪多糖具有毒副作用小、无残留、不产生耐药性 [2] 等优点。
目前，黄芪多糖的提取主要采用水提醇沉法或醇碱提取等方法，其中水提醇沉法应用最多。宋建华 [3] 通过对黄芪多糖水煎提取工艺优化试验研究表明，多糖含量随因素变化差别较小，而收率差异明显；发现以加 12 倍水，提取 3 次，每次 1.5h 为最佳工艺，其中多糖的得率为 2.0%，但是这种方法第一次提取物纯度不高，于是孙瑞敏等 [4] 改进了传统 100℃水煮醇沉法从黄芪中提取多糖的方法，在适当的温（62～68℃）进行提取，避免将多种物质同时提出，使提取物的组成单一，第一次提取物的纯度能达到 96%以上，且外观为白色，再经一次提纯后纯度可达到 99%以上。而李红民等人 [5] 则采用碱提取法提取黄芪多糖，对影响黄芪多糖提取率的提取溶剂 pH 值、料液比、提取时间、提取温度 4 个因素进行了单因素实验设计,确定最佳提取条件,利用紫外(可见)分光光度法和红外光谱法从不同角度对醇碱提取法提取黄芪多糖的提取率进行检测,同时与水提取法和碱提取法进行比较.实验结果表明,醇碱提取法提高了黄芪多糖的提取含量,达到 12.15%，残渣中有效成分残留量低,是较理想的。
2 2 ． 研究目标及意义：
对于黄芪中多糖的提取分离，很少有文章对多种方法在同一篇
文章中进行比较，本实验旨在用不同方法对等量的实验材料进行试验，从而更好的比较六种实验方法的优劣，为提高黄芪的综合利用及生产开发提供可靠依据。
参考文献 ：
[1]翁 玲,刘 彦,刘学英,等.黄芪多糖粉针剂对小鼠免疫功能的影响[J].免疫学杂志, 2003,19(3): 243-244.[2]李宏全,段县平,马海利,等.黄芪多糖提高鸡抗氧化作用对免疫功能的影响[J].山西农业大学学报, 2002,22(1): 78-81.[3]宋建华，黄芪多糖的萃取提纯及组分鉴定.实用医药杂志 2011 年 04 月第 28 卷第 04 期.[4]孙瑞敏，刘冬平，陈俊，等．黄芪多糖的提取[J]．南开大学学报（自然科学版），2005，38（1）：33－36.[5]李红民，黄仁泉，王亚洲．提高黄芪多糖提取收率的工艺研究[J]．西北大学学报，2000，30（9）：509－510.[6]李万玉，李安荣，徐晓玉，李法猉.黄芪多糖的提取方法[J].重庆医科大学学报,2009,18(11):13-15.[7]向 东,赖凤英,梁平.碱法提取南瓜多糖的研究[J].食品工业科技, 2004,25(11): 120-122.)[8]于晓辉，万仁玲，欧阳林山等.黄芪多糖的分离纯化和含量测定研究进展[J].中国兽药杂志,2008,42(9):50-52.[9]刘遵峰,刘雪萍,梁晓勇,等.黄芪总多糖的提取与分离[J].南开大学学报,2003,36(3):22-25.[10]方升平，王维香，雒小龙.川芎多糖除蛋白方法研究[J].时珍国医国药.2009，(09):38-41 [11]曹忠荣,阎昊鹏,郭文莉.干法无胶纤维板粘合机理的研究:(Ⅱ)干法无胶纤维板的红外光谱分析[J].木材工业, 1996,10(5): 3-6.[12]郭亚贞,王 慥,曲鹏鹏.香菇多糖的纯化和结构分析[J].上海水产大学学报, 2000,9(3): 35-39.[13] CreswellC J.SpectralAnalysis of Organic Compounds [M]: 2nd ed.Minneapolis: BurgessPublishingCompany, 1972.三． 研究的主要内容、研究方案及准备采取的技术路线、拟解决的关键问题 1.主要内容
通过水提醇沉、碱提醇沉及碱醇提醇沉等方法提取黄芪多糖，除蛋白，活性炭脱色，并用红外光谱仪对各方法多得黄芪多糖的结构进行分析比较。
2.实验方法 2.1 水提醇沉法 取黄芪细粉 20 g，分别加 12 倍、10 倍水煎煮 2 次，抽滤，合并 2 次滤液，减压浓缩，加适量 95％乙醇，使最终含醇量为 80％，过夜，抽滤，沉淀依次用丙酮、无水乙醇洗涤，得黄芪多糖粗品,平行三次实验。
2.2 醇除水提法 取黄芪细粉 20g，用 80%乙醇液、液固比 7∶1 冷凝回流 80min，提取 3 次，过滤药渣（挥干溶剂），液固比 12∶1 冷凝回流 75 min，水提三次后过滤，将三次滤液合并，浓缩加适量 95％乙醇，使最终含醇量为 80％，过夜，抽滤，沉淀依次用丙酮、无水乙醇洗涤，得黄芪多糖粗品，平行三次实验。
2.3NaOH 水提醇沉法 取黄芪药材 20 g，分别加 12 倍、l0 倍量用 NaOH 调 pH 为 12的碱水煎煮 2 次，抽滤，合并 2 次滤液，调 pH 值为中性，减压浓缩，加适量 95％乙醇使最终含醇量为 80％，过夜，抽滤，沉淀依次用丙酮、无水乙醇洗涤，得黄芪多糖粗品,平行三次实验。
2.4NaOH 醇提醇沉法 取黄芪药材 20 g, 分别加 12 倍、10 倍量用 NaOH 调 pH 为12 的含 5%乙醇的碱醇回流提取 2 次, 抽滤, 合并 2 次滤液, 调pH 值为中性, 减压浓缩, 然后加适量 95% 乙醇,使最终含醇量为80%, 过夜, 抽滤, 沉淀依次用丙酮、无水乙醇洗涤, 得黄芪多糖粗品,平行三次实验。
2.5CaO 水提醇沉法 取黄芪药材 20g，分别加 12 倍、10 倍量用 CaO 调 pH 为 12 的碱水煎煮 2 次，抽滤，合并 2 次滤液，调 pH 值为中性，减压浓缩，然后加适量 95％乙醇，使最终含醇量为 80％，过夜，抽滤，沉淀依次用丙酮、无水乙醇洗涤，得黄芪多糖粗品,平行三次实验。
2.6CaO 醇提醇沉法 取黄芪药材 20g，分别加 12 倍、10 倍量用 CaO 调 pH 为 12 的含 5％乙醇的碱醇回流提取 2 次，抽滤，合并 2 次滤液，调 pH 值为中性，减压浓缩至，然后加适量 95％乙醇，使最终含醇量为 80％，过夜，抽滤，沉淀依次用丙酮、无水乙醇洗涤，得黄芪多糖粗品，平行三次实验。
3 技术路线 黄芪细粉 20g 80%乙醇液、液固比 7∶1 冷凝回流 80min，提取 3 次，过滤 药渣（挥干溶剂）乙醇溶液（回收乙醇）液固比 12∶1 冷凝回流 75 min 水提三次后过滤 水提液（将三次合并）药渣 浓缩醇沉 粗多糖 图 1 醇水法提取黄芪多糖 黄芪细粉 20g 加入调节 PH=12 的 5%乙醇提取溶剂、液固比 10∶1、90℃条件下提取 90 min,提取 2 次，过滤 提取液（将两次合并）药渣 浓缩沉糖，并烘干 沉淀物 多糖提取物 图 2 醇碱法提取黄芪多糖 4 所要解决的关键问题 不同的工艺条件，所需的条件各不相同，比如温度，PH 值，料液比等的掌握尤为重要。黄芪多糖的收率及提取成本不同。判断黄芪多糖提取工艺的优良，可以从以下几个方面考虑：①黄芪多糖的得率；②所提粗黄芪多糖的含糖量，③整个工艺流程是否经济；④保持所提的黄芪多糖具有活性。
四． 已进行的科研工作基础和已具备的科学研究条件（包括已经取得的科研成果、已经完成的科学实验及调查研究、具备的主要仪器设备及资料与数据等），以及可行性分析
宋建华[3]通过对黄芪多糖水煎提取工艺优化试验研究表明，多糖含量随因素变化差别较小，而收率差异明显；发现以加 12 倍水，提取 3 次，每次 1.5h 为最佳工艺，其中多糖的得率为 2.0%，但是这种方法第一次提取物纯度不高，于是孙瑞敏等[4]改进了传统 100℃水煮醇沉法从黄芪中提取多糖的方法，在适当的温（62～68℃）进行提取，避免将多种物质同时提出，使提取物的组成单一，第一次提取物的纯度能达到 96%以上，且外观为白色，再经一次提纯后纯度可达到 99%以上。而李红民等人[5]则采用碱提取法提取黄芪多糖，对影响黄芪多糖提取率的提取溶剂 pH 值、料液比、提取时间、提取温度 4 个因素进行了单因素实验设计,确定最佳提取条件,利用紫外(可见)分光光度法和红外光谱法从不同角度对醇碱提取法提取黄芪多糖的提取率进行检测,同时与水提取法和碱提取法进行比较.实验结果表明,醇碱提取法提高了黄芪多糖的提取含量,达到 12.15%，残渣中有效成分残留量低,是较理想的。此前已经进行过有关黄芪中黄芪多糖的分离、精制及鉴定的实验，对实验流程及方法有了相当程度的了解，理学院化学实验室具备各方法所需仪器及相关试剂材料。因此此实验可行。
五． 课题研究起止年限、任务安排、分阶段要求和预期结果 1 1 ． 课题研究起止年限及任务安排 1．2013 年 9 月—2013 年 12 月 查阅文献资料，制定试验方案，编写开题报告。
2．2013 年 12 月—2013 年 1 月 进行试验及各个试验项目的测定。
3．2014 年 1 月—2014 年 4 月 数据分析，综合结果，撰写论文初稿。
4．2014 年 4 月—2014 年 5 月 修改初稿，完成论文终稿，提交论文，进行答辩。
2 2 ．预期结果 研究论文。
六、课程学习完成情况 注：课程学习没有完成的本科生一般不允许进行开题报告 培养单位（院）成绩管理员签字：
年 月 日 七、开题专家组审查意见 专家组签字（签章）：
年 月 日 八、教研室和 培养单位（院）审查意见 教研室主任（签章）：
年 月 日 院长（签章）：
院盖章 年 月 日 备注：
