分离实验九
1、了解卵磷脂的性质。
2、学习提取卵磷脂粗品的方法。
机体的各种组织和细胞均含卵磷脂。在蛋黄（约 10％）、神经、精液、脑髓、骨髓、肾上腺、心脏、蘑菇和酵母等组织内含量很高。卵磷脂分子中具有亲水基团和疏水基团，卵磷脂具有降低表面张力的作用；卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”，蛋黄卵磷脂可将胆固醇乳化为极细的颗粒，这种微细的乳化胆固醇颗粒可透过血管壁被组织利用，而不会使血浆中的胆固醇增加，可作为药物用于动脉粥样硬化等疾病的综合治疗。
纯卵磷脂（即磷脂酰胆碱）为白色蜡状块，不溶于水，易溶于醇、氯仿、乙醚和二硫化碳中，但不溶于丙酮，利用后一性质可与中性脂肪分离。
（1）试剂：
新鲜蛋黄、95％乙醇、10％的 NaOH 溶液、丙酮、乙醚（2）器材：
磁力搅拌机（或玻棒）、减压真空浓缩装置、恒温水浴锅、冰箱、多用循环水真空泵、布氏漏斗、玻璃漏斗、玻璃棒、小烧杯等 1、制备工艺路线：
2、操作方法：
① 抽提：按照实验八剩下的蛋黄（3 个）的质量，加入 2 倍质量的预热至 35℃－40℃的95％乙醇，可按体积、密度计算（不需很精确）（注意一定要缓慢的加入，边加边缓慢搅拌，否则会出现沉淀得不到抽提液），加入乙醇后，不断搅拌 10－12 小时（由于时间关系，具体实验时改为 1.5~2 小时），离心得上清液（4000r/min，5 分钟）。
② 浓缩：将上述上清液减压真空浓缩或沸水浴蒸发，（要做好标记，注意要防止盛有抽提液的瓶子歪倒在水浴锅，造成浪费）至原体积的 1/6 左右。
③ 去杂：在搅拌下加入浓缩后等体积的乙醚（要缓慢），不断搅拌并放置 2 小时（由于时间关系，具体实验时改为 10 分钟），使不溶物沉淀完全。过滤除去杂质，收集上清液（乙醚澄清液）。注意事项同步骤（1）。（由于时间关系，该步骤省略）④ 沉淀卵磷脂：在急速搅拌下加入与上清等体积的预冷丙酮（丙酮在冰箱里），即开始出现卵磷脂沉淀，用滴管吸取，做鉴定。（抽滤，收集并再用丙酮洗涤，挥发去乙醚丙酮残液，真空干燥得块状成品。不做）⑤ 定性鉴定卵磷脂：取制品少量置于试管中，加入 20％的 NaOH 溶液约 2ml，于沸水浴煮沸，卵磷脂分解生成胆碱，胆碱在碱的作用下，形成三甲胺。注意：三甲胺有明显的鱼腥味。
思考题 1、记录卵磷脂的分离鉴定结果。
答：加入氢氧化钠后，可以闻到一股浓烈的鱼腥味。
2、第一步为什么要用预热至 35 ℃－40 ℃的 95 ％乙醇抽提产品？ 答：
35-40℃时，卵磷脂在乙醇中的溶解度是最大的，更易于提取卵磷脂。
3、浓缩是为了去水还是去醇？为什么要浓缩？ 答 ：去醇。蛋黄中卵磷脂含量本来就少，如不浓缩直接进行下面的步骤，反应现象不明显，判断不了卵磷脂的存在。
